檢測所需試劑

1. 實(shí)驗(yàn)室一級純水
2. 乙酸鉉：分析純。
3. 氫氧化鈉：分析純。
4. L-半胱氨酸：生化試劑，純度≥99.0%。
5.二乙基二硫代氨基甲酸納:分析純。
6. 氫氧化鉀：分析純。
7. 鹽酸：分析純。
8. 過硫酸鉀：分析純。
9. 硼氫化鉀：分析純。
10. 甲基汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液100ug/mL：市售以甲醇為溶劑的有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，開封后于-20℃冷凍保存，避光、密封可保存12個月。
11. 乙基汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液100ug/mL：市售以甲醇為溶劑的有證標(biāo)準(zhǔn)溶液，開封后于-20℃冷凍保存，避光、密封可保存12個月。
12. 甲醇溶液:用甲醇與實(shí)驗(yàn)用水按照1:9的體積比進(jìn)行混合，制得體積分?jǐn)?shù)為10%的甲醇溶液。
13. DDTC溶液：稱取0.1g二乙基二硫代氨基甲酸納溶解于100g實(shí)驗(yàn)用水中，制得質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的DDTC改性溶液，用于固相萃取柱的活化。
14. 乙酸鉉60mmoL、半胱氨酸10mmoL、體積分?jǐn)?shù)5%的甲醇混合溶液：量取體積分?jǐn)?shù)為10%的甲醇溶液500mL,乙酸鉉4.62g,L-半胱氨酸1.21g,用實(shí)驗(yàn)用水定容至1000mL,經(jīng)溶劑過濾器過微孔濾膜抽濾，并超聲30min以上，用作液相色譜的流動相。
15. 鹽酸溶液：量取70mL濃鹽酸，溶于實(shí)驗(yàn)用水并稀釋至1000mL,制得體積分?jǐn)?shù)7%的鹽酸溶液，用作載流溶液。
16. 氫氧化鉀-硼氫化鉀溶液:
  稱取3.5g氫氧化鉀,0.2g硼氫化鉀，溶于實(shí)驗(yàn)用水并稀釋至1000mL,制得氫氧化鉀、硼氫化鉀混合溶液，用作還原劑，當(dāng)日配制使用。
17. 過硫酸鉀-氫氧化鉀溶液：
  稱取1.0g過硫酸鉀和3.5g氫氧化鉀，溶于實(shí)驗(yàn)用水并稀釋至1000mL,制得過硫酸鉀、氫氧化鉀混合溶液，用作氧化劑，當(dāng)日配制使用。
18. 甲基汞和乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)中間液：
  分別準(zhǔn)確移取1.00mL的甲基汞和乙基汞標(biāo)準(zhǔn)儲備液于100mL容量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，得到1000.0ug/L的甲基汞和乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。
19. 甲基汞和乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)使用液1：
  準(zhǔn)確移取5.00mL濃度為1000.0ug/L的甲基汞和乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)中間液于50mL容量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，得到濃度為100.0ug/mL的甲基汞和乙基汞的混合標(biāo)準(zhǔn)中間液。再準(zhǔn)確移取5.00mL上述濃度為100.0ug/mL的甲基汞和乙基汞混合的標(biāo)準(zhǔn)中間液于100mL容量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，得到濃度為5.0ug/mL甲基汞和乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)使用液。
20. 甲基汞和乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)使用液2：
  準(zhǔn)確移取5.G0mL濃度為1000.0ug/mL的甲基汞和乙基汞混合標(biāo)準(zhǔn)中間液于100mL容量瓶中，加甲醇溶液稀釋至刻度，得到濃度為50.0ug/mL甲基汞和乙基汞合標(biāo)準(zhǔn)使用液。

檢測所需材料及設(shè)備

1. C18固相萃取柱。
2. 微孔濾膜:0.45um 水系/有機(jī)系混合濾膜。
3. 固相萃取裝置：手動、自動均可。
4. 液相色譜-原子熒光聯(lián)用儀。
5. 微量進(jìn)樣針：100 uL。
6. 分析天平：感量0. 0001g。

水樣采集

  釆集水樣的體積不少于1500mL。釆集的水樣應(yīng)置于聚乙烯容器中，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH值至3-7之間，密封保存。水樣如不能立即分析，需置于避光陰涼保存，保存時間不超過3d,若只測甲基汞，此條件下可保存7d。

檢測步驟

水樣的制備

  水樣的制備分為固相萃取柱活化、水樣富集和洗脫三個步驟。首先將C18固相萃取柱活化，分別用4mL的甲醇溶液和4mL的去離子水清洗，然后過4mL的DDTC改性液進(jìn)行改性，過4mL的去離子水沖洗。將1000mL的水樣以5mL/min的流速通過C18的固相萃取柱，然后用4mL去離子水沖洗柱子，再用甲醇溶液清洗。取10mL的乙酸鉉、半胱氨酸、甲醇混合溶液以1mL/min的流速，對SPE小柱進(jìn)行洗脫，收集洗脫液待測定。

儀器條件

  液相色譜條件：反向C18柱，150mmX4.6mm,5um；流動相為乙酸鉉、半胱氨酸、甲醇溶液的混合溶液；液相泵泵速：1mL/min；進(jìn)樣體積：100uL。原子熒光光譜儀條件：燈電流30mA；負(fù)高壓270V。

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

  分別準(zhǔn)確移取0.00mL、0.10mL、0.20mL、1.00mL、2.00mL濃度為5.0ug/L的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液于5個10mL容量瓶中，用甲醇溶液稀釋至標(biāo)線，搖勻，得到濃度為0.00ug/L、0.05ug/L、0.10ug/L、0.50ug/L、1.00ug/L的低濃度系列曲線。分別準(zhǔn)確移取0.40mL、0.80mL、1.20mL、1.60mL、2.00mL濃度為50.0ug/L的混合標(biāo)準(zhǔn)使用液于5個lOmL容量瓶中，用甲醇溶液稀釋至標(biāo)線，搖勻，得到濃度為2.00ug/L、4.00ug/L、6.00ug/L、8.00ug/L、10.00ug/L的高濃度系列曲線。

水樣檢測

  經(jīng)過富集后的水樣按照設(shè)定好的儀器條件進(jìn)行檢測，記錄保留時間和峰面積。空白實(shí)驗(yàn)可以用一級純水按照水樣制備步驟進(jìn)行操作。最終水樣的甲基汞和乙基汞的質(zhì)量濃度可以按照相應(yīng)公式計算得出。
  以上內(nèi)容來源于《DB65/T 4367-2021 水質(zhì) 甲基汞和乙基汞的測定 液相色譜-原子熒光光譜法》